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• 一种T细胞CRISPER文库筛选方法 公开日期：2025-03-21 公开号：CN115679452A 申请号：CN202211367898.7
  发明 一种T细胞CRISPER文库筛选方法

  • 申请号：CN202211367898.7
  • 公开号：CN115679452A
  • 公开日期：2025-03-21
  • 申请人：复旦大学附属肿瘤医院

  本发明公开了小鼠T细胞CRISPER文库筛选方法，包括如下步骤：a)小鼠免疫相关基因的sgRNA质粒文库的构建；b)质粒文库的包装、转染；c)体内开展CRISPR‑Cas9文库高通量筛选，获得调节T细胞功能的重要基因。通过本发明的方法可以筛选出调节T细胞功能的重要基因，为揭示其在肿瘤免疫治疗中的作用机制，改善过继性细胞免疫治疗奠定了实验基础。

  发布时间：2023-06-12 12:00:40

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• 蛋白共修饰DNA芯片及其制备方法 公开日期：2025-03-21 公开号：CN113913944A 申请号：CN202111182158.1
  发明 蛋白共修饰DNA芯片及其制备方法

  • 申请号：CN202111182158.1
  • 公开号：CN113913944A
  • 公开日期：2025-03-21
  • 申请人：深圳市真迈生物科技有限公司

  本申请公开了一种蛋白共修饰DNA芯片及其制备方法。该蛋白共修饰DNA芯片包括具有表面的基底，所称的表面为修饰后的表面，所称的表面共价连接有蛋白和DNA。该蛋白共修饰DNA芯片，蛋白通过共价连接在表面，不仅具有原料来源广、综合成本低、易制备等优点，而且，通过共价键固定更牢靠，蛋白不容易解吸附，能够避免或减少由此带来的非特异吸附。

  发布时间：2023-04-22 09:08:56

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• 利用单管添加方案的加标签的核酸的文库制备 公开日期：2025-02-25 公开号：CN112210834A 申请号：CN202010451081.2
  发明 利用单管添加方案的加标签的核酸的文库制备

  • 申请号：CN202010451081.2
  • 公开号：CN112210834A
  • 公开日期：2025-02-25
  • 申请人：伊鲁米那股份有限公司

  本申请涉及利用单管添加方案的加标签的核酸的文库制备。本申请提供了一种制备加标签的核酸片段的文库的方法，所述方法包括：使细胞群体与具有一种或更多种蛋白酶的裂解试剂直接接触，以生成细胞裂解物；使蛋白酶失活，以生成失活的细胞裂解物，和在其中靶核酸和转座子末端成分经历转座反应的条件下，将转座酶和包含转移链的转座子末端成分应用至失活的细胞裂解物。本申请还提供了一种用于制备加标签的核酸片段的文库的试剂盒，所述试剂盒包括：(a)裂解试剂，所述裂解试剂具有一种或更多种蛋白酶，和(b)转座反应组合物，所述转座反应组合物具有至少一种转座酶和包含转移链的至少一种转座子末端成分。

  发布时间：2023-06-23 07:04:11

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• 一种用于检测与目标基因座相互作用的DNA片段的文库构建方法 公开日期：2025-02-25 公开号：CN117845339A 申请号：CN202410031540.X
  发明 一种用于检测与目标基因座相互作用的DNA片段的文库构建方法

  • 申请号：CN202410031540.X
  • 公开号：CN117845339A
  • 公开日期：2025-02-25
  • 申请人：广西壮族自治区人民医院

  本发明提供一种用于检测与目标基因座相互作用的DNA片段的文库构建方法。该方法包括：交联样本细胞内的DNA与蛋白质，酶切交联体中的DNA，加测序接头，重连DNA片段，解交联，加文库接头，和目标片段文库扩增的步骤。通过本发明的方法构建文库用时少、起始量低、有效数据比例高且便于实验操作。

  发布时间：2024-04-11 07:29:49

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• 组合物及文库构建方法 公开日期：2025-02-14 公开号：CN114606575A 申请号：CN202011416103.8
  发明 组合物及文库构建方法

  • 申请号：CN202011416103.8
  • 公开号：CN114606575A
  • 公开日期：2025-02-14
  • 申请人：广东菲鹏生物有限公司

  本发明公开了一种组合物及文库构建方法。本发明通过在连接反应体系中引入增强剂，有效提升了连接效率，同时应用于核酸文库构建中，接头二聚体残留低，显著提升了测序有效数据量含量，减少了数据的浪费，一定程度上降低了测序成本。

  发布时间：2023-05-12 12:09:19

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• 基于绵羊全基因组CRISPR-Cas9敲除文库筛选绵羊卵泡颗粒细胞FSH应答基因 公开日期：2025-02-11 公开号：CN118087051A 申请号：CN202410281808.5
  发明 基于绵羊全基因组CRISPR-Cas9敲除文库筛选绵羊卵泡颗粒细胞FSH应答基因

  • 申请号：CN202410281808.5
  • 公开号：CN118087051A
  • 公开日期：2025-02-11
  • 申请人：内蒙古农业大学|||内蒙古自治区农牧业科学院|||内蒙古大学|||内蒙古犇牛科技有限公司

  本发明提供了基于绵羊全基因组CRISPR‑Cas9敲除文库筛选绵羊卵泡颗粒细胞FSH应答基因，属于基因生物工程技术领域。本发明针对绵羊全基因组编码基因设计sgRNA探针，并构建绵羊全基因组CRISPR‑Cas9sgRNA文库，重点将绵羊2号、3号和X染色体编码基因的CRISPR‑Cas9sgRNA文库敲除绵羊卵泡颗粒细胞，构建了3条染色体的特异性敲除细胞库，基于该细胞敲除库可筛选出与FSH作用相关基因，并结合转录组测序进一步探究出FSH促进颗粒细胞增殖的剂量依赖性基因。

  发布时间：2024-06-01 08:02:28

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• 构建启动子文库的方法 公开日期：2025-01-28 公开号：CN114908426A 申请号：CN202210029814.2
  发明 构建启动子文库的方法

  • 申请号：CN202210029814.2
  • 公开号：CN114908426A
  • 公开日期：2025-01-28
  • 申请人：常州药物研究所有限公司

  本发明属于生物技术技术领域，具体涉及一种构建启动子文库的方法，其包括：获取基因组序列和序列注释；根据序列注释设置启动子位置信息；根据启动子位置信息进行筛选，获取启动子序列以构建启动子文库；根据启动子序列设计用于一步克隆法连接的引物；根据引物获得启动子片段；根据启动子片段构建重组载体；对重组载体转化并提取质粒；以及将质粒转化后获得不同强度的启动子，实现了全基因组尺度上的启动子挖掘，并通过虚拟筛选和实验筛选得到不同强度的启动子，该启动子文库的构建方法也可应用于其他微生物天然启动子的挖掘与筛选。

  发布时间：2023-05-20 11:00:35

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• 一种仿生超疏水-亲水集成孔板及基于该孔板的高通量自动化核酸建库仪 公开日期：2025-01-17 公开号：CN117626452A 申请号：CN202311613583.0
  发明 一种仿生超疏水-亲水集成孔板及基于该孔板的高通量自动化核酸建库仪

  • 申请号：CN202311613583.0
  • 公开号：CN117626452A
  • 公开日期：2025-01-17
  • 申请人：山东大学

  本发明涉及一种仿生超疏水‑亲水集成孔板及基于该孔板的高通量自动化核酸建库仪，属于核酸检测技术领域，本发明孔板的加样孔为通孔，通孔侧壁为超疏水，通孔底部为亲水硅片，基于仿生学原理，设计了具有表面微纳复合结构与超低表面能的仿生超疏水低粘附孔板，孔板内壁超疏水低粘附，极大减少了样本及试剂的吸附和损耗；孔板底部集成导热系数高、热稳定好、亲水性能佳的硅片，充分保障PCR扩增过程中的温度控制的同时，亲水的性能也强化了样本和试剂间的融合反应，减少气泡，极大的减少核酸扩增和纯化过程中试剂和产物在内壁的吸附和损耗，显著提高实际建库的产物量。

  发布时间：2024-03-05 07:16:15

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• 酶法靶序列随机sgRNA文库的制备方法 公开日期：2024-12-27 公开号：CN114293264A 申请号：CN202111586539.6
  发明 酶法靶序列随机sgRNA文库的制备方法

  • 申请号：CN202111586539.6
  • 公开号：CN114293264A
  • 公开日期：2024-12-27
  • 申请人：翌圣生物科技（上海）股份有限公司

  本发明提供了一种酶法靶序列随机sgRNA文库的制备方法，其特征在于其步骤包括：采用随机切口酶Nt.CviPII对样本DNA目标序列的PAM区域进行切口；含BbsI酶切位点的接头磁珠连接片段化的DNA；BbsI切割释放DNA；随机引物延伸；连接含MmeI酶切位点的sgRNA骨架；MmeI切割释放原间隔区域；连接T7启动子序列；扩增获得含T7启动子的sgRNA文库模板；体外转录获得sgRNA文库。本发明的酶法靶序列随机sgRNA文库的制备方法，可以一次性制备随机覆盖目标区域的所有sgRNA组，具有成本低、制作简单、覆盖均一、偏好性小、不受靶序列长度限制和无需大批量设计sgRNA等优点，在靶基因的捕获和去除上具有重要的应用价值。

  发布时间：2023-05-05 09:57:12

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• 生成双链衔接物的方法 公开日期：2024-12-13 公开号：CN113279067A 申请号：CN202110251569.5
  发明 生成双链衔接物的方法

  • 申请号：CN202110251569.5
  • 公开号：CN113279067A
  • 公开日期：2024-12-13
  • 申请人：赛科恩斯生物科学公司|||南加利福尼亚大学

  本申请涉及样品制备方法。本公开内容提供了制备用于测序的核酸样品的单扩增法和双扩增法。

  发布时间：2023-06-18 07:07:37

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