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• 一种全基因组DNA胞嘧啶羟甲基化修饰的单碱基精确度建库方法 公开日期：2023-05-23 公开号：CN116145267A 申请号：CN202310109550.6
  发明 一种全基因组DNA胞嘧啶羟甲基化修饰的单碱基精确度建库方法

  • 申请号：CN202310109550.6
  • 公开号：CN116145267A
  • 公开日期：2023-05-23
  • 申请人：生工生物工程（上海）股份有限公司

  本发明公开了一种全基因组DNA胞嘧啶羟甲基化修饰的单碱基精确度建库方法，涉及基因组学、表观遗传学和分子生物学技术领域。其内容包括如下步骤：5hmC标记反应；点击化学反应；样本DNA片段化；通过磁珠将片段化产物纯化；5hmC片段化DNA捕获；洗涤捕获产物；还原反应；APOBEC酶脱氨反应；脱氨产物的纯化；双链转化反应；末端修复和3′端加A反应；接头连接；连接产物纯化与双分选；文库扩增；文库纯化。该建库方法在保证数据真实的前提下，集低数据量、单碱基精确度和适用于常规双链建库试剂盒于一体。具有较高的通用性和数据高度可重复的技术优势。

  发布时间：2023-05-28 11:47:17

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• 蛹虫草Ptrpc重叠启动子文库及其应用 公开日期：2023-05-23 公开号：CN116145266A 申请号：CN202111408176.7
  发明 蛹虫草Ptrpc重叠启动子文库及其应用

  • 申请号：CN202111408176.7
  • 公开号：CN116145266A
  • 公开日期：2023-05-23
  • 申请人：华南农业大学|||广州君研生物科技有限公司

  本发明公开一种蛹虫草Ptrpc重叠启动子文库及其应用，属于食用菌合成生物学领域。本发明选用了PtrpC这一强度适中、尺寸较小(369bp)的启动子，通过Biobrick法构建了分别含有1‑9个拷贝的Ptrpc启动子组成的具有不同启动强度的重叠启动子文库，实现了随着启动子拷贝数增加而启动强度线性增强的启动子文库，为在蛹虫草中定量控制不同基因的表达水平比例奠定基础。

  发布时间：2023-05-28 11:40:54

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• 一种DNA编码化合物脱除苄基的方法 公开日期：2023-05-19 公开号：CN116136032A 申请号：CN202111353662.3
  发明 一种DNA编码化合物脱除苄基的方法

  • 申请号：CN202111353662.3
  • 公开号：CN116136032A
  • 公开日期：2023-05-19
  • 申请人：成都先导药物开发股份有限公司

  本发明涉及一种DNA编码化合物脱除苄基的方法，该方法以On‑DNA含有苄基保护的氨基和/或羟基化合物为原料，在钯催化剂、氢源存在条件下反应得到On‑DNA含有氨基和/或羟基的化合物。本发明提供的DNA编码化合物脱除苄基的方法能够在有机溶剂/水相的混合水相中进行，后处理简单，条件温和，能够在较短时间内高收率得到高多样性的DNA编码化合物库，并且适用于多孔板进行的DNA编码化合物的合成。

  发布时间：2023-05-24 13:10:16

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• Flag免疫噬菌体展示抗体库的构建方法、Flag抗体scFv1及其应用 公开日期：2023-05-16 公开号：CN116121882A 申请号：CN202211279558.9
  发明 Flag免疫噬菌体展示抗体库的构建方法、Flag抗体scFv1及其应用

  • 申请号：CN202211279558.9
  • 公开号：CN116121882A
  • 公开日期：2023-05-16
  • 申请人：翌圣生物科技（上海）股份有限公司

  本发明提供一种KLH‑Flag免疫噬菌体展示抗体库的构建方法，其步骤包括：(1)用KLH‑Flag蛋白免疫新西兰大白兔，提取淋巴细胞的总RNA，逆转录成cDNA；(2)利用PCR技术扩增重链可变区和轻链可变区片段并拼接成scFv基因；(3)构建pCANTAB5E‑2sfi1‑scFv重组质粒，电转化至TG1感受态细胞，构建噬菌体单链抗体库；(4)特异性富集噬菌体单链抗体库，从中筛选出阳性克隆。并公开了最终得到应用的单克隆抗体氨基酸序列。本发明通过噬菌体展示抗体库技术筛选得到高亲和力的兔源单链抗体,该抗体对Flag蛋白的亲和力高，特异性强,该抗体可用于制备Anti‑Flag亲和凝胶的抗体和可用于WB检测带有Flag标签的蛋白等。

  发布时间：2023-05-24 12:54:27

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• 一种双药效团DNA编码化合物库的合成方法 公开日期：2023-05-16 公开号：CN116121881A 申请号：CN202211556531.X
  发明 一种双药效团DNA编码化合物库的合成方法

  • 申请号：CN202211556531.X
  • 公开号：CN116121881A
  • 公开日期：2023-05-16
  • 申请人：重庆大学

  本发明涉及DNA编码化合物库技术领域，尤其涉及一种双药效团DNA编码化合物库的合成方法，构建可逆共价的“Y型”DNA起始片段，合成双药效团DNA编码化合物库；进行双药效团DNA编码化合物库与单药效团DNA编码化合物库的可控转化；使得DNA编码化合物库与多种筛选体系兼容；将单药效团DNA编码化合物库进行动态组合化合物库的构建，并利用共价交联基团将动态结构进行平衡锁定；将单药效团DNA编码化合物库与其它单药效团化合物库进行组合，进行自组装多药效团库的构建；通过DNA杂交与共价交联，将单药效团DNA编码化合物库与功能DNA偶联物配对结合。本发明方法通过可逆共价“Y型”DNA起始片段，同时提高了DNA编码化合物库合成的高效性和筛选的灵活性。

  发布时间：2023-05-19 10:46:56

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• 一种筛选小鼠精子发生相关互作蛋白的方法及应用 公开日期：2023-05-09 公开号：CN116084026A 申请号：CN202211509700.4
  发明 一种筛选小鼠精子发生相关互作蛋白的方法及应用

  • 申请号：CN202211509700.4
  • 公开号：CN116084026A
  • 公开日期：2023-05-09
  • 申请人：扬州大学

  本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种筛选小鼠精子发生相关互作蛋白的方法及应用，通过提取小鼠单倍体生精细胞RNA反转录、扩增合成双链cDNA，并与pGADT7‑Rec共转化至Y187中构建酵母双杂交cDNA文库；扩增目的蛋白编码基因序列并构建诱饵质粒，与cDNA文库共培养后接种于营养缺失型培养基上，经多次铺板排除假阳性后挑取蓝色单克隆菌落进行PCR鉴定及测序，确认相互作用蛋白；构建的文库可应用于不同目的蛋白大批量、多次筛选小鼠精子发生相关蛋白；提供的筛选方法，可以同时大量获取目的蛋白的互作蛋白及其编码基因序列，为深入研究精子发生相关蛋白的功能及分子机制提供可能。

  发布时间：2023-05-12 11:06:35

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• 一种高通量构建RNA测序文库的方法及试剂盒 公开日期：2023-05-05 公开号：CN116065240A 申请号：CN202210982842.6
  发明 一种高通量构建RNA测序文库的方法及试剂盒

  • 申请号：CN202210982842.6
  • 公开号：CN116065240A
  • 公开日期：2023-05-05
  • 申请人：格物致和生物科技（北京）有限公司|||格物智造科技（成都）有限公司

  本公开涉及构建测序文库的方法、基因探针组合以及试剂盒。本公开的建库方法可以结合二代测序等测序手段实现超多重数字化基因表达检测，可以同时检测出成百上千(甚至全基因组)的基因表达，特异并且无偏检测样本中基因的表达量。本公开的基因探针组合(靶向探针)可用于直接捕获RNA进行二代测序建库。

  发布时间：2023-05-10 10:52:13

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• 单细胞基因组测序用的DNA文库的构建方法 公开日期：2023-05-05 公开号：CN110952147A 申请号：CN201911311804.2
  发明 单细胞基因组测序用的DNA文库的构建方法

  • 申请号：CN201911311804.2
  • 公开号：CN110952147A
  • 公开日期：2023-05-05
  • 申请人：南方科技大学

  本发明涉及一种单细胞基因组测序用的DNA文库的构建方法，该方法包括：将细胞核内的DNA片段化，得到DNA被片段化的细胞核；采用不同的序列标签对多个细胞核内的片段化DNA进行多轮标记，使得各细胞核内的片段化DNA连接有由多个序列标签组成的标签码，各细胞核的片段化DNA连接的标签码各不同；及扩增连接有标签码的片段化DNA，得到单细胞基因组测序用的DNA文库。该方法快捷且成本较低。

  发布时间：2023-05-12 10:26:16

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• 一种用于构建基因芯片检测的文库的方法 公开日期：2023-05-02 公开号：CN116043336A 申请号：CN202211686014.4
  发明 一种用于构建基因芯片检测的文库的方法

  • 申请号：CN202211686014.4
  • 公开号：CN116043336A
  • 公开日期：2023-05-02
  • 申请人：上海亿康医学检验所有限公司

  本发明提供了一种用于构建基因芯片检测的文库的方法。本发明的方法包括：在待测样本扩增中引入能够进行切除测序接头的酶切位点来构建文库。其中，所述引入能够进行切除测序接头的酶切位点包括在扩增引物的测序接头中引入碱基U。本发明对于需要进行芯片检测的样本，不必须先进行传统的WGA扩增，只需要将文库进行接头切除即可，节省时间成本。

  发布时间：2023-05-12 09:49:11

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• DNA甲基化标志物筛查试剂盒及方法 公开日期：2023-05-02 公开号：CN116043337A 申请号：CN202310064681.7
  发明 DNA甲基化标志物筛查试剂盒及方法

  • 申请号：CN202310064681.7
  • 公开号：CN116043337A
  • 公开日期：2023-05-02
  • 申请人：江苏鹍远生物科技股份有限公司

  本发明涉及DNA甲基化标志物筛查试剂盒及方法。本发明方法包括酶切、甲基化接头连接、甲基化处理和索引引物扩增，其中，使用对甲基化不敏感的限制性内切酶对感兴趣DNA序列进行所述酶切，获得酶切产物，其中，所述酶切产物未经末端修复和补齐而直接与带有甲基化修饰的接头连接，且其中，所述酶切产物包含具有粘性末端的酶切产物和任选的具有平末端的酶切产物。本发明也提供相应的接头序列、索引引物序列、经过优选的试剂、试剂盒以及相关的应用。

  发布时间：2023-05-12 09:55:28

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