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发明

一种广谱性狂犬病病毒样颗粒抗原的设计及其稳定表达细胞株HEK-293

2023-06-18 07:23:32 发布于四川 2
  • 申请专利号：CN202111469929.5
  • 公开（公告）日：2022-04-01
  • 公开（公告）号：CN114262365A
  • 申请人：华东理工大学
摘要：本发明先利用CVS株狂犬病病毒RABV的糖蛋白RVGP和基质蛋白RVMP自组装成的RVLPs为抗原，设计一种广谱性狂犬病病毒样颗粒抗原；然后将RVGP、RVMP和EGFP共同构建到真核表达载体pcDNA3.1(+)中，命名为pcDNA3.1(+)‑RVLPs‑EGFP。每个蛋白都具有独立的启动子(CMV)、核糖体结合位点(Kozak序列)和PloyA尾(PA)，以保证每个蛋白的表水平，同时利用EGFP实时监测目的蛋白的表达，构建真核重组表达质粒；而后将真核重组表达质粒转染HEK‑293细胞，细胞经扩增和传代后，进行筛选和鉴定，筛选得到稳定高效表达RVLPs的阳性单克隆细胞株HEK‑293/RVLPs。获得抗原具有哺乳动物细胞的翻译后修饰，克服了细菌、酵母、昆虫以及植物细胞来源的RVLPs由于糖基化修饰不正确而表现出低免疫原性，为RVLPs抗原的规模化生产奠定了基础。

专利内容

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 114262365 A (43)申请公布日 2022.04.01 (21)申请号 202111469929.5 A61P 31/14 (2006.01) (22)申请日 2021.12.03 (71)申请人 华东理工大学 地址 200237 上海市徐汇区梅陇路130号 (72)发明人 马兴元　赵章婷　郑文云　邓昌平　 (74)专利代理机构 上海顺华专利代理有限责任 公司 31203 代理人 李鸿儒 (51)Int.Cl. C07K 14/145 (2006.01) C12N 15/85 (2006.01) C12N 15/47 (2006.01) C12N 15/65 (2006.01) C12N 5/10 (2006.01) A61K 39/205 (2006.01) 权利要求书2页 说明书14页 序列表6页 附图11页 (54)发明名称 一种广谱性狂犬病病毒样颗粒抗原的设计 及其稳定表达细胞株HEK-293 (57)摘要 本发明先利用CVS株狂犬病病毒RABV的糖蛋 白RVGP和基质蛋白RVMP自组装成的RVLPs为抗 原，设计一种广谱性狂犬病病毒样颗粒抗原；然 后将RVGP、RVMP和EGFP共同构建到真核表达载体 pcDN

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