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发明

一种假单胞菌来源硫醌氧化还原酶体外表达纯化方法及其应用2025

2024-03-11 07:11:44 发布于四川 5
  • 申请专利号：CN202311472755.7
  • 公开（公告）日：2025-06-20
  • 公开（公告）号：CN117646015A
  • 申请人：江西农业大学
摘要：本发明提供一种假单胞菌来源硫醌氧化还原酶体外表达纯化方法，并使其应用于丙硫醇的降解，该方法以一株高效降解丙硫醇的恶臭假单胞菌S‑1全基因组为模板，克隆硫醌氧化还原酶编码基因sqr，选择pET28a作为表达载体，将sqr基因和线性化的载体使用一步克隆的方法构建重组质粒pET28a‑sqr，通过热激转化导入大肠杆菌BL21，成功构建BL21/pET28a‑sqr表达菌株。经培养诱导后，超声破碎后通过重力法组氨酸标签纯化得到SQR蛋白。后续以BL21/pET28a作为对照菌株，基于气相色谱‑质谱仪GC‑MS(Gas Chromatography coupled to Mass Spectrometry)测定重组表达菌株及SQR蛋白转化丙硫醇能力。通过本发明提供的方法获得一种硫醌氧化还原酶并表征其转化丙硫醇的功能，将有利于硫醇降解菌的应用与改造。

专利内容

(19)国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 117646015 A (43)申请公布日 2024.03.05 (21)申请号 202311472755.7 C12R 1/19 (2006.01) (22)申请日 2023.11.07 (71)申请人 江西农业大学 地址 330033 江西省南昌市志敏大道1101 号 (72)发明人 李骏　方诗琦　唐宇航　陈国庆　 周雯雯　谢琳琳　孙超　万爽　 (74)专利代理机构 湖北创融蓝图知识产权代理 事务所 (特殊普通合伙) 42276 专利代理师 陶专 (51)Int.Cl. C12N 15/70 (2006.01) C12N 9/02 (2006.01) C12N 1/21 (2006.01) 权利要求书1页 说明书6页 附图3页 (54)发明名称 一种假单胞菌来源硫醌氧化还原酶体外表 达纯化方法及其应用 (57)摘要 本发明提供一种假单胞菌来源硫醌氧化还 原酶体外表达纯化方法，并使其应用于丙硫醇的 降解，该方法以一株高效降解丙硫醇的恶臭假单 胞菌S‑1全基因组为模板，克隆硫醌氧化还原酶 编码基因sqr，选择pET28a作为表达载体，将sqr 基因和线性化的载体使用一步克隆的方法构建 重组质粒pET28a‑sqr，通过热激转化导入大肠杆 菌BL21 ，成功构建BL21/pET28a‑sqr表达菌

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