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发明

一种筛选小鼠精子发生相关互作蛋白的方法及应用

2023-05-12 11:06:35 发布于四川 1
  • 申请专利号：CN202211509700.4
  • 公开（公告）日：2023-05-09
  • 公开（公告）号：CN116084026A
  • 申请人：扬州大学
摘要：本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种筛选小鼠精子发生相关互作蛋白的方法及应用，通过提取小鼠单倍体生精细胞RNA反转录、扩增合成双链cDNA，并与pGADT7‑Rec共转化至Y187中构建酵母双杂交cDNA文库；扩增目的蛋白编码基因序列并构建诱饵质粒，与cDNA文库共培养后接种于营养缺失型培养基上，经多次铺板排除假阳性后挑取蓝色单克隆菌落进行PCR鉴定及测序，确认相互作用蛋白；构建的文库可应用于不同目的蛋白大批量、多次筛选小鼠精子发生相关蛋白；提供的筛选方法，可以同时大量获取目的蛋白的互作蛋白及其编码基因序列，为深入研究精子发生相关蛋白的功能及分子机制提供可能。

专利内容

(19)国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 116084026 A (43)申请公布日 2023.05.09 (21)申请号 202211509700.4 (22)申请日 2022.11.29 (71)申请人 扬州大学 地址 225009 江苏省扬州市大学南路88号 (72)发明人 郑英　周慧萍　 (74)专利代理机构 扬州苏中专利事务所(普通 合伙) 32222 专利代理师 许必元 (51)Int.Cl. C40B 50/06 (2006.01) C12N 15/12 (2006.01) C12N 15/81 (2006.01) C07K 14/47 (2006.01) G01N 33/68 (2006.01) 权利要求书2页 说明书8页 序列表（电子公布） 附图4页 (54)发明名称 一种筛选小鼠精子发生相关互作蛋白的方 法及应用 (57)摘要 本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种筛 选小鼠精子发生相关互作蛋白的方法及应用，通 过提取小鼠单倍体生精细胞RNA反转录、扩增合 成双链cDNA，并与pGADT7‑Rec共转化至Y187中构 建酵母双杂交cDNA文库；扩增目的蛋白编码基因 序列并构建诱饵质粒，与cDNA文库共培养后接种 于营养缺失型培养基上，经多次铺板排除假阳性 后挑取蓝色单克隆菌落进行PCR鉴定及

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