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PCT发明

嵌合质粒文库的构建方法

2023-07-01 07:18:15 发布于四川 0
  • 申请专利号：CN202080026680.8
  • 公开（公告）日：2024-09-06
  • 公开（公告）号：CN113728130A
  • 申请人：国立大学法人神户大学
摘要：本发明的课题为提供能够高效地构建长链DNA的组合文库、容易确认所得克隆的基因型的新型微生物细胞转化用DNA片段制备方法。本发明为微生物细胞转化用DNA片段的制备方法，其中，所述微生物细胞转化用DNA片段具有至少1个插入DNA单元，所述插入DNA单元包含含有在宿主微生物中有效的复制起点的DNA、和单位DNA连接而成的插入DNA，所述方法的特征在于包括下述步骤：步骤(A)，通过OGAB方法制备多种含有插入DNA单元的质粒，所述插入DNA单元是使能够以特定的连接顺序进行连接的多种单位DNA连接而成的；步骤(B)，将通过步骤(A)制备的多种质粒用适合各质粒的限制性内切酶处理，分解为单位DNA，制备多种单位DNA混合液；和步骤(C)，使用通过步骤(B)得到的多种单位DNA混合液，通过OGAB法重新组装单位DNA，制备长链DNA片段。

专利内容

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 113728130 A (43)申请公布日 2021.11.30 (21)申请号 202080026680.8 (74)专利代理机构 北京市金杜律师事务所 11256 (22)申请日 2020.03.24 代理人 周莎 (30)优先权数据 (51)Int.Cl. 2019-069798 2019.04.01 JP C40B 40/06 (2006.01) (85)PCT国际申请进入国家阶段日 C12P 19/34 (2006.01) 2021.09.30 C12N 15/10 (2006.01) (86)PCT国际申请的申请数据 C12N 15/63 (2006.01) PCT/JP2020/013133 2020.03.24 (87)PCT国际申请的公布数据 WO2020/203496 JA 20

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