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发明

一种基因突变文库的合成方法及其应用2023

2023-09-18 07:38:26 发布于四川 2
  • 申请专利号：CN202211729510.3
  • 公开（公告）日：2023-09-15
  • 公开（公告）号：CN115852495A
  • 申请人：苏州泓迅生物科技股份有限公司
摘要：本发明提供了一种基因突变文库的合成方法及其应用，所述方法包括：通过PCR反应将双链形式的目标DNA转换成含有dUTP的单链DNA；通过梯度降温式退火反应将Trimer引物连接至上述含有dUTP的单链DNA上，所述退火反应的程序为90‑95℃孵育5‑10min，以0.1‑0.2℃/s从90‑95℃降至20‑30℃，20‑30℃孵育30‑35min；退火后经过序列延伸、连接反应，形成Trimer结合下的双链杂合DNA突变序列集合；将所述集合经UDG酶消化，以消化产物为模板进行PCR扩增，获得目标基因特定区域多样化的突变序列集合；将所得序列集合与载体重组连接形成重组质粒，得到基因突变文库。

专利内容

(19)国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 115852495 A (43)申请公布日 2023.03.28 (21)申请号 202211729510.3 (22)申请日 2022.12.30 (71)申请人 苏州泓迅生物科技股份有限公司 地址 215123 江苏省苏州市苏州工业园区 星湖街218号生物纳米园C20栋 (72)发明人 刘海虹　柳伟强　杨平　黄国帅　 齐金才　 (74)专利代理机构 北京品源专利代理有限公司 11332 专利代理师 刘二艳 (51)Int.Cl. C40B 50/06 (2006.01) C40B 40/06 (2006.01) C12N 15/10 (2006.01) C12N 15/70 (2006.01) 权利要求书2页 说明书12页 序列表（电子公布） 附图4页 (54)发明名称 一种基因突变文库的合成方法及其应用 (57)摘要 本发明提供了一种基因突变文库的合成方 法及其应用，所述方法包括：通过PCR反应将双链 形式的目标DNA转换成含有dUTP的单链DNA；通过 梯度降温式退火反应将Trimer引物连接至上述 含有dUTP的单链DNA上，所述退火反应的程序为 90‑95℃孵育5‑10min，以0.1‑0.2℃/s从90‑95℃ 降至20‑30℃，20‑30℃孵育30‑35min；退火

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