发明

一种高效RNA多重靶向建库方法及试剂盒2024

2024-03-05 07:11:39 发布于四川 0
  • 申请专利号:CN202211052212.5
  • 公开(公告)日:2024-03-01
  • 公开(公告)号:CN117626451A
  • 申请人:羿鸣(苏州)诊断技术有限公司
摘要:本发明公开了一种高效RNA多重靶向建库方法,所述方法包括以下步骤:1)用多重特异性RT引物对片段化RNA样本进行逆转录和cDNA二链生成反应,得到包含目标区域的双链cDNA逆转录产物;2)通过多重线性扩增引物与上一步骤生成的包含目标区域的双链cDNA第二链互补结合,进行线性扩增,纯化后得到单链线性扩增产物;3)向单链线性扩增产物中加入连接酶和接头,得到连接产物;4)将连接产物进行PCR扩增,得到RNA测序文库。本发明的RNA多重靶向建库方法将一步法cDNA二链生成技术与单引物线性扩增建库技术相结合,简化了多重靶向建库过程,提高了建库效率,特别是提高了对于短片段RNA分子的检测能力。

专利内容

(19)国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 117626451 A (43)申请公布日 2024.03.01 (21)申请号 202211052212.5 (22)申请日 2022.08.31 (71)申请人 羿鸣 (苏州)诊断技术有限公司 地址 215163 江苏省苏州市高新区锦峰路8 号2号楼411-20室 (72)发明人 杨国华 郭志伟 余佳佳 车彬  (74)专利代理机构 上海德禾翰通律师事务所 31319 专利代理师 侯莉 (51)Int.Cl. C40B 50/06 (2006.01) C12Q 1/6806 (2018.01) C12N 15/11 (2006.01) C12Q 1/6869 (2018.01) 权利要求书1页 说明书13页 序列表(电子公布) 附图1页 (54)发明名称 一种高效RNA多重靶向建库方法及试剂盒 (57)摘要 本发明公开了一种高效RNA多重靶向建库方 法,所述方法包括以下步骤:1)用多重特异性RT 引物对片段化RNA样本进行逆转录和cDNA二链生 成反应,得到包含目标区域的双链cDNA逆转录产 物;2)通过多重线性扩增引物与上一步骤生成的 包含目标区域的双链cDNA第二链互补结合,进行 线性扩增,纯化后得到单链线性扩增产物;3)向 单链线性扩增产物中加入连接酶和接头

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