发明

一种基于转座酶的DNA/RNA共建库方法、试剂盒及应用

2023-05-24 13:34:46 发布于四川 0
  • 申请专利号:CN202010958566.0
  • 公开(公告)日:2021-01-08
  • 公开(公告)号:CN112195521A
  • 申请人:翌圣生物科技(上海)有限公司
摘要:本发明公开了一种基于转座酶的DNA/RNA共建库方法及其试剂盒,该方法包括步骤:1)从样本中共提取DNA和RNA;2)以RNA为模板,通过逆转录生成cDNA第一链,最终形成RNA/cDNA杂交双链和原始DNA的混合液;3)使用包含转座子序列的转座酶复合体对步骤2)中的RNA/cDNA杂交双链和原始DNA进行片段化,并同时加上接头序列;4)使用逆转录酶和具有链置换活性的DNA聚合酶对产物进行缺口补齐;5)用文库扩增引物对产物进行扩增;6)产物经纯化回收后,得到混合的RNA/DNA文库;7)对步骤6)所得的混合RNA/DNA文库进行质检。该方法具有建库时间短、操作简单、成本低的优点。本发明还公开了上述方法和试剂盒在鉴定微生物种类以及在检测癌症组织样本的基因突变和基因融合方面的应用。

专利内容

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 112195521 A (43)申请公布日 2021.01.08 (21)申请号 202010958566.0 C12Q 1/04 (2006.01) (22)申请日 2020.09.11 (71)申请人 翌圣生物科技(上海)有限公司 地址 200120 上海市浦东新区天雄路166弄 1号楼402室 (72)发明人 曹振 罗秉轮 宋东亮 秦雪梅  戴广伟  (74)专利代理机构 上海宣宜专利代理事务所 (普通合伙) 31288 代理人 刘洁瑜 (51)Int.Cl. C40B 50/06 (2006.01) C12Q 1/6869 (2018.01) C12Q 1/6858 (2018.01) C12Q 1/70 (2006.01) 权利要求书2页 说明书17页 序列表2页 附图2页 (54)发明名称 一种基于转座酶的DNA/RNA共建库方法、试 剂盒及应用 (57)摘要 本发明公开了一种基于转座酶的DNA/RNA共 建库方法及其试剂盒,该方法包括步骤:1)从样 本中共提取DNA和RNA;2)以RNA为模板,通过逆转 录生成cDNA第一链,最终形成RNA/cDNA杂交双链 和原始DNA的混合液;3)使用包含转座子序列的

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