发明

RNA、DNA共建库测序方法及建库仪器

2023-06-02 12:04:47 发布于四川 0
  • 申请专利号:CN202011491371.6
  • 公开(公告)日:2021-03-02
  • 公开(公告)号:CN112430849A
  • 申请人:深圳易倍科华生物科技有限公司
摘要:本发明提供一种RNA、DNA共建库测序方法,所述方法包括:将待测DNA/RNA总核酸样本中的RNA进行打断处理,得到RNA片段;使用随机引物对所述RNA片断进行逆转录以获得cDNA片段,优选的使用含分子标签UMI R的随机引物序列以区分所述cDNA片断和总核酸中存在的第一DNA片断;加入磁珠进行第一纯化后去除磁珠以获得上清DNA并转移至新试管;对经所述第一纯化的上清DNA经机械打断法或酶打断法打断至测序需要的第二DNA片段;进行第一接头连接和第二接头连接并进行纯化处理,以获得第一产物;对所述第一产物进行PCR扩增反应,并进行第四纯化处理,完成建库。本发明提供的技术方案,实现同时对DNA、RNA进行建库,提高了样本使用效率以及建库效率。

专利内容

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 112430849 A (43)申请公布日 2021.03.02 (21)申请号 202011491371.6 (22)申请日 2020.12.16 (71)申请人 深圳易倍科华生物科技有限公司 地址 518000 广东省深圳市宝安区新安街 道兴东社区群辉路3号优创空间2号楼 415 (72)发明人 徐飞岳 缑灵山 管少华 黎亿爱  (74)专利代理机构 深圳市创富知识产权代理有 限公司 44367 代理人 钟文翰 (51)Int.Cl. C40B 50/06 (2006.01) 权利要求书1页 说明书8页 附图4页 (54)发明名称 RNA、DNA共建库测序方法及建库仪器 (57)摘要 本发明提供一种RNA、DNA共建库测序方法, 所述方法包括:将待测DNA/RNA总核酸样本中的 RNA进行打断处理,得到RNA片段;使用随机引物 对所述RNA片断进行逆转录以获得cDNA片段,优 选的使用含分子标签UMI R的随机引物序列以区 分所述cDNA片断和总核酸中存在的第一DNA片 断;加入磁珠进行第一纯化后去除磁珠以获得上 清DNA并转移至新试管;对经所述第一纯化的上 清DNA经机械打断法或酶打断法打断至测序需要 的第二DNA片段;进行第一接头连接和第二接头 连接并进行纯化处理,以获得第一产物;对所述 第一产物进行PCR扩增反应,并进行第四纯化处 A 理,完成建库。本发明提供的技术方案,实现同时 9 对

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