一种基于双链环化的MGI测序平台测序文库的构建方法

专利内容

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 112226821 A (43)申请公布日 2021.01.15 (21)申请号 202011107885.7 (22)申请日 2020.10.16 (71)申请人 鲲羽生物科技（江门）有限公司 地址 529100 广东省江门市民科园创业服 务中心大楼 (72)发明人 闫科技　张智慧　 (74)专利代理机构 北京捷诚信通专利事务所 (普通合伙) 11221 代理人 王卫东 (51)Int.Cl. C40B 50/06 (2006.01) 权利要求书1页 说明书8页 附图3页 (54)发明名称 一种基于双链环化的MGI测序平台测序文库 的构建方法 (57)摘要 本发明公开了一种基于双链环化的MGI测序 平台测序文库的构建方法，包括以下步骤：构建 双链结构的接头骨架，接头骨架具有MGI测序平 台要求的接头序列，且可供TA连接，在中间部分 保留有一段单链结构；样本DNA片段化以及末端 修复加A；以构建好的所述双链结构的接头骨架 和末端修复加A的DNA片段为底物，利用TA连接成 环，生成双链连接产物；使用外切酶对所述双链 连接产物进行消化，只保留成环的那条单链结 构，然后对消化产物进行纯化，从而获得兼容MGI 测序平台的最终文库。本发明，在环化过程中利 A 用TA连接原理在双链基础上进行环化，然后获得 1 可以直接上机的单链环状测序文库，构建过程简 2 8 6 单、快捷，并且杜绝了由于扩增产生的信息改变。 2 2