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发明
白花草木樨基于毛状根遗传转化体系的基因组编辑系统和编辑方法2025
2025-03-12 12:00:57
发布于四川
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- 申请专利号：CN202411836044.8
- 公开（公告）日：2025-03-11
- 公开（公告）号：CN119592615A
- 申请人：中国科学院青岛生物能源与过程研究所
摘要：本发明涉及一种白花草木樨基于毛状根遗传转化体系的基因组编辑系统和编辑方法，属于植物基因工程技术领域。本发明根据白花草木樨MaPDS基因上的两个靶位点构建了MaPDS基因的编辑载体系统，所述编辑系统为CRISPR_2.0‑MtLAP1‑KO‑MaPDS；利用所述编辑系统以白花草木樨下胚轴为外植体材料，通过发根农杆菌介导的下胚轴外植体侵染法获得毛状根，同时基于MtLAP1转录因子过表达累积花青苷“显色”的原理，可视化、快速、高效筛选获得阳性毛状根并实现红色阳性毛状根MaPDS基因的高效编辑。本发明方法可有效减少白花草木樨毛状根诱导过程中实生根的发生，防止农杆菌污染，降低检测工作量，实现靶基因的高效基因编辑。
专利内容
本发明涉及一种白花草木樨基于毛状根遗传转化体系的基因组编辑系统和编辑方法，属于植物基因工程技术领域。本发明根据白花草木樨MaPDS基因上的两个靶位点构建了MaPDS基因的编辑载体系统，所述编辑系统为CRISPR_2.0‑MtLAP1‑KO‑MaPDS；利用所述编辑系统以白花草木樨下胚轴为外植体材料，通过发根农杆菌介导的下胚轴外植体侵染法获得毛状根，同时基于MtLAP1转录因子过表达累积花青苷“显色”的原理，可视化、快速、高效筛选获得阳性毛状根并实现红色阳性毛状根MaPDS基因的高效编辑。本发明方法可有效减少白花草木樨毛状根诱导过程中实生根的发生，防止农杆菌污染，降低检测工作量，实现靶基因的高效基因编辑。C12N15/82(2006.01);C12N15/29(2006.01);C12N15/65(2006.01);A01H5/06(2018.01);A01H6/54(2018.01)
