一种高通量的转录组测序文库构建方法及其应用

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(19)国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 114622286 A (43)申请公布日 2022.06.14 (21)申请号 202011470290.8 (22)申请日 2020.12.14 (71)申请人 中国农业大学 地址 100193 北京市海淀区圆明园西路2号 (72)发明人 赖锦盛　陈建　 (74)专利代理机构 北京纪凯知识产权代理有限 公司 11245 专利代理师 白艳 (51)Int.Cl. C40B 50/06 (2006.01) C40B 40/06 (2006.01) C12Q 1/6869 (2018.01) 权利要求书2页 说明书15页 序列表29页 附图6页 (54)发明名称 一种高通量的转录组测序文库构建方法及 其应用 (57)摘要 本发明公开了一种高通量的转录组测序文 库构建方法及其应用。应用本发明的技术方案， 通过在反转录合成cDNA第一链的过程引物一级 条形码，实现了不同待测样品文库在同一实验中 的并行构建。通过在反转录合成cDNA第一链的过 程引物唯一分子识别码，实现了PCR过程产生的 重复序列的有效识别和去除。通过引入一级和二 级条形码，以及通过基于转录本3’端对基因表达 水平进行检测，实现了文库构建和测序的高通 量。本发明具有与常规转录组测序相当的基因表 达水平检测准确性和表达基因检出效率。同时与 A 常规