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发明

过表达毕赤酵母分子伴侣提高外源蛋白表达量的方法2024

2024-02-04 07:26:17 发布于四川 0
  • 申请专利号：CN202311815881.8
  • 公开（公告）日：2024-01-30
  • 公开（公告）号：CN117467695A
  • 申请人：南京鸿瑞杰生物医疗科技有限公司
摘要：本发明提供了过表达毕赤酵母分子伴侣提高外源蛋白表达量的方法，涉及生物技术技术领域，包括以下步骤：采用mCherry‑XL作为报告蛋白；筛选最高拷贝且荧光蛋白在胞内聚集的菌株作为出发菌株SK01；通过CRISPR‑Cas9基因编辑技术将MPDI1、PDI1、HAC1、YAP1、Kar2、Ero1分泌辅助因子基因分别过表达整合至SK01菌株；本发明筛选荧光蛋白作为出发菌株，从基因工程方面进行分泌途径遗传改造，通过基因编辑技术将分泌辅助因子基因分别过表达整合至筛选出的菌株，从而提高外源荧光蛋白分泌能力；且转化体系在PCR八连管操作及孵育、热激过程在PCR扩增仪完成，大幅提高了实验操作效率。

专利内容

(19)国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 117467695 A (43)申请公布日 2024.01.30 (21)申请号 202311815881.8 (22)申请日 2023.12.27 (71)申请人 南京鸿瑞杰生物医疗科技有限公司 地址 211300 江苏省南京市高淳区经济开 发区戴卫西路10号 (72)发明人 朱小琴　胡昊　周坚　赵敏　崔彦　 (74)专利代理机构 江苏盐城世拓专利代理事务 所(普通合伙) 32526 专利代理师 仓定平 (51)Int.Cl. C12N 15/81 (2006.01) C12N 15/65 (2006.01) C12N 15/64 (2006.01) C12N 15/67 (2006.01) C12N 15/90 (2006.01) 权利要求书3页 说明书7页 序列表（电子公布） 附图4页 (54)发明名称 过表达毕赤酵母分子伴侣提高外源蛋白表 达量的方法 (57)摘要 本发明提供了过表达毕赤酵母分子伴侣提 高外源蛋白表达量的方法，涉及生物技术技术领 域，包括以下步骤：采用mCherry‑XL作为报告蛋 白；筛选最高拷贝且荧光蛋白在胞内聚集的菌株 作为出发菌株SK01；通过CRISPR‑Cas9基因编辑 技术将MPDI1、PDI1、HAC1、YAP1、Kar2、Ero1分泌 辅

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