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发明

RNA快速建库方法及其应用

2023-06-23 07:22:26 发布于四川 0
  • 申请专利号：CN202110673954.9
  • 公开（公告）日：2024-03-19
  • 公开（公告）号：CN113322523A
  • 申请人：翌圣生物科技（上海）股份有限公司
摘要：本发明提供一种RNA快速建库方法(Easy‑seq)，其步骤包括：提取样本中的total RNA，采用逆转录阻碍探针法去除rRNA，同时逆转录获得一端带有P7序列的cDNA；对多余的随机引物进行消解处理；对cDNA进行多聚腺苷酸化，在cDNA的3’端加上polyA，采用带有3’突出末端的双链DNA接头，在cDNA的另一端接上P5序列；文库扩增及回收。Easy‑seq具有耗时短、操作简单和损失小等优点，因此可以应用于单细胞转录组测序(scEasy‑seq)。相较于已有的scRNA‑seq技术，scEasy‑seq具有基因检出率高、RNA信息完整和建库产量高等优点，是一种高效灵敏的单细胞转录组测序技术，可以广泛应用于科学研究和疾病诊断等领域。

专利内容

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 113322523 A (43)申请公布日 2021.08.31 (21)申请号 202110673954.9 (22)申请日 2021.06.17 (71)申请人 翌圣生物科技（上海）股份有限公司 地址 200120 上海市浦东新区天雄路166弄 1号楼402室 (72)发明人 陈晶晶　江翱　马海玲　侯策　 王嫚　曹振　宋东亮　 (74)专利代理机构 苏州根号专利代理事务所 (普通合伙) 32276 代理人 朱华庆 (51)Int.Cl. C40B 50/06 (2006.01) C12Q 1/6869 (2018.01) 权利要求书1页 说明书13页 附图7页 (54)发明名称 RNA快速建库方法及其应用 (57)摘要 本发明提供一种RNA快速建库方法(Easy‑ seq)，其步骤包括：提取样本中的total RNA，采 用逆转录阻碍探针法去除rRNA，同时逆转录获得 一端带有P7序列的cDNA；对多余的随机引物进行 消解处理；对cDNA进行多聚腺苷酸化，在cDNA的 3’端加上polyA，采用带有3’突出末端的双链DNA 接头，在cDNA的另一端接上P5序列；文库扩增及 回收。Easy‑seq具有耗时短、操作简单和损失小 等优点，因此可以应用于单细胞转录组测序 (scEasy‑seq)。相较于已有的scRNA‑seq技术， scEasy‑seq具有基因检出率高、RNA信息完整和

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