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一种基于启动子构建文库的方法及其文库

2023-05-09 11:07:07 发布于四川 0
  • 申请专利号:CN202210161966.8
  • 公开(公告)日:2022-04-29
  • 公开(公告)号:CN114411266A
  • 申请人:深圳华大基因股份有限公司
摘要:一种基于启动子构建文库的方法及其文库。该方法包括:打断步骤,包括对待测样本进行打断处理,获得打断后的待测样本;酶促甲基化转化步骤,包括对打断后的待测样本进行酶促甲基化转化;T7启动子连接步骤,包括将酶促甲基化转化处理后的待测样本与T7启动子退火,反应得到连接有T7启动子的待测样本;体外转录步骤,包括将连接有T7启动子的待测样本转录为RNA;反转录及扩增步骤,包括对RNA进行反转录、PCR扩增,获得文库。相比于现有技术中直接做PCR,本发明中T7的转录(针对富含尿嘧啶的DNA)更加均一,转录能获得较多的RNA作为下一步cDNA扩增的模板,极大地提升了甲基化的覆盖度。

专利内容

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 114411266 A (43)申请公布日 2022.04.29 (21)申请号 202210161966.8 (22)申请日 2022.02.22 (71)申请人 深圳华大基因股份有限公司 地址 518083 广东省深圳市盐田区洪安三 街21号华大综合园7栋7层-14层 (72)发明人 王娟 唐冲  (74)专利代理机构 深圳鼎合诚知识产权代理有 限公司 44281 代理人 周建军 彭家恩 (51)Int.Cl. C40B 50/06 (2006.01) C40B 40/06 (2006.01) C12Q 1/6806 (2018.01) C12Q 1/6869 (2018.01) 权利要求书1页 说明书8页 序列表2页 附图7页 (54)发明名称 一种基于启动子构建文库的方法及其文库 (57)摘要 一种基于启动子构建文库的方法及其文库。 该方法包括:打断步骤,包括对待测样本进行打 断处理,获得打断后的待测样本;酶促甲基化转 化步骤,包括对打断后的待测样本进行酶促甲基 化转化;T7启动子连接步骤,包括将酶促甲基化 转化处理后的待测样本与T7启动子退火,反应得 到连接有T7启动子的待测样本;体外转录步骤, 包括将连接有T7启动子的待测样本转录为RNA;

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