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发明

一种猪全转录因子激活文库构建方法及其筛选调控OCT4基因的转录因子的方法2024

2024-01-26 08:28:48 发布于四川 0
  • 申请专利号：CN202311275904.0
  • 公开（公告）日：2024-01-19
  • 公开（公告）号：CN117418319A
  • 申请人：东北农业大学
摘要：本发明公开了一种猪全转录因子激活文库构建方法及其筛选调控OCT4基因的转录因子的方法，属于分子生物学领域。本发明解决了目前基因组规模的功能获得筛选方法在很大程度上局限于cDNA文库过表达系统的使用，而合成和使用聚合cDNA文库的成本高且复杂的问题。本发明为了筛选猪中调控OCT4表达的转录因子，构建了猪全转录因子CRISPR激活文库，具体技术方案如下：首先筛选猪的转录因子，针对转录因子设计合成sgRNA后构建慢病毒sgRNA文库，同时构建既表达OCT4启动子驱动的EGFP，又表达dCas9‑SAM系统元件的细胞系，最后利用构建好的sgRNA文库感染该细胞系，再通过sgRNA富集来筛选调控OCT4表达的转录因子。本研究所述的方法可为猪这一物种筛选和研究转录因子功能及调控网络提供有力的工具。

专利内容

(19)国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 117418319 A (43)申请公布日 2024.01.19 (21)申请号 202311275904.0 C12N 5/10 (2006.01) (22)申请日 2023.09.28 (71)申请人 东北农业大学 地址 150030 黑龙江省哈尔滨市香坊区长 江路600号 (72)发明人 牟彦双　刘忠华　梁英娟　王金鹏　 耿立爽　姚晓霞　 (74)专利代理机构 哈尔滨市阳光惠远知识产权 代理有限公司 23211 专利代理师 王志新 (51)Int.Cl. C40B 40/02 (2006.01) C40B 50/06 (2006.01) C12N 15/12 (2006.01) C12N 15/867 (2006.01) 权利要求书1页 说明书10页 附图9页 (54)发明名称 一种猪全转录因子激活文库构建方法及其 筛选调控OCT4基因的转录因子的方法 (57)摘要 本发明公开了一种猪全转录因子激活文库 构建方法及其筛选调控OCT4基因的转录因子的 方法，属于分子生物学领域。本发明解决了目前 基因组规模的功能获得筛选方法在很大程度上 局限于cDNA文库过表达系统的使用，而合成和使 用聚合cDNA文库的成本高且复杂的问题。本发明 为了筛选猪中调控OCT4表达的转录因子，构建了 猪全转录因子CRISPR激活文库，

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