改良高盐-低pH法提取灯盏细辛叶绿体基因组DNA的方法

专利内容

(19)国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 114990103 A (43)申请公布日 2022.09.02 (21)申请号 202110223657.4 (22)申请日 2021.03.01 (71)申请人 中国中医科学院中药研究所 地址 100700 北京市东城区东直门内南小 街16号 (72)发明人 黄璐琦　赵瑜君　郭娟　于一凡　 (74)专利代理机构 北京纪凯知识产权代理有限 公司 11245 专利代理师 关畅 (51)Int.Cl. C12N 15/10 (2006.01) 权利要求书2页 说明书5页 附图2页 (54)发明名称 改良高盐-低pH法提取灯盏细辛叶绿体基因 组DNA的方法 (57)摘要 本发明公开了改良高盐‑低pH法提取灯盏细 辛叶绿体基因组DNA的方法。本发明方法，包括如 下步骤：(1)将经饥饿处理的灯盏细辛叶片加入 缓冲液A中进行匀浆，过滤，收集滤液；对滤液进 行第一次离心，收集上清液；对上清液进行第二 次离心，收集绿色沉淀，得到粗叶绿体；(2)在步 骤(1)得到的粗叶绿体中加入缓冲液B，轻悬，离 心，收集沉淀，得到叶绿体；(3)在步骤(2)得到的 叶绿体中加入缓冲液C，再加入蛋白酶进行温育， 冷却；(4)从步骤(3)裂解后的体系中提取叶绿体 DNA，得到叶绿体基因组DNA。本发明方法可简单、 A 快速获取完整的叶绿体及叶绿体DNA，所得DNA结 3 构完整、质量高、纯度好，未出现降解现象，能够 0 1 0 满足后续测序工作的标准和要求。 9