发明

一种多样本超高通量单细胞转录组测序文库的构建方法

2023-06-15 07:05:44 发布于四川 0
  • 申请专利号:CN202211637054.X
  • 公开(公告)日:2023-06-13
  • 公开(公告)号:CN116254611A
  • 申请人:南方科技大学
摘要:本发明提供了一种多样本超高通量单细胞转录组测序文库的构建方法,利用细胞核原位Tn5酶切反应构建单细胞转录组文库,简化了转录组文库构建中cDNA扩增步骤,不需要第二链的合成,缩短了实验流程;通过第一轮标签序列添加,实现多样本混样单批次建库;通过两轮标签序列的添加,实现单芯片多倍过载上样,提高了单次反应可检测的样品数量和细胞数量,大大降低了单细胞文库的制备成本。本发明还提高了反应效率和测序数据质量,单次反应可检测的细胞数量大大增加,单细胞可检出基因数显著提高。本发明还提供一种多样本超高通量单细胞转录组测序文库的构建体系,使用自主研发的反应试剂体系,降低了单细胞文库的制备成本,具有较高的普遍适用性。

专利内容

(19)国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 116254611 A (43)申请公布日 2023.06.13 (21)申请号 202211637054.X (22)申请日 2022.12.16 (71)申请人 南方科技大学 地址 518055 广东省深圳市南山区桃源街 道学苑大道1088号 (72)发明人 陈曦 徐玮  (74)专利代理机构 深圳市君胜知识产权代理事 务所(普通合伙) 44268 专利代理师 孙果 (51)Int.Cl. C40B 50/06 (2006.01) C12Q 1/6869 (2018.01) C12Q 1/6806 (2018.01) 权利要求书2页 说明书13页 序列表(电子公布) 附图1页 (54)发明名称 一种多样本超高通量单细胞转录组测序文 库的构建方法 (57)摘要 本发明提供了一种多样本超高通量单细胞 转录组测序文库的构建方法 ,利用细胞核原位 Tn5酶切反应构建单细胞转录组文库,简化了转 录组文库构建中cDNA扩增步骤,不需要第二链的 合成,缩短了实验流程 ;通过第一轮标签序列添 加,实现多样本混样单批次建库;通过两轮标签 序列的添加,实现单芯片多倍过载上样,提高了 单次反应可检测的样品数量和细胞数量,大大降 低了单细胞文库的制备成本。本发明还提高了反 应效率和测序数据质量,单次反应可检测

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