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发明

一种紫花苜蓿双靶点基因编辑遗传转化体系构建的方法2023

2023-11-16 07:54:16 发布于四川 83
  • 申请专利号：CN202310050184.1
  • 公开（公告）日：2023-11-14
  • 公开（公告）号：CN117051030A
  • 申请人：西北农林科技大学|||高景慧|||彭嘉文
摘要：本发明属于紫花苜蓿基因编辑技术领域，具体涉及一种紫花苜蓿CRISPR/Cas9遗传转化体系构建的方法。本发明的目的是弥补目前CRISPR/Cas9技术在紫花苜蓿基因编辑系统建立和体系优化的空缺，提供一种基于CRISPR/Cas9技术的紫花苜蓿高效遗传转化体系，克服在遗传转化过程中编辑植株再生周期长、转化效率低及依赖基因型等问题。本发明的体系不同于传统植物基因编辑遗传转化体系，无需诱导愈伤组织，为紫花苜蓿基因编辑育种及分子水平研究提供重要体系构建技术。特别是可以解决紫花苜蓿难以形成愈伤组织，培养周期长、转化效率低等组织培养技术的瓶颈。本发明提供了一种基于CRISPR/Cas9技术直接使用紫花苜蓿茎尖作为外植体进行双靶点基因编辑遗传转化，包括紫花苜蓿茎尖外植体的制备，双靶点基因编辑载体的构建，外源DNA分子侵染外植体的获取，具有抗性外植体的筛选，带有丛生芽外植体的培养，紫花苜蓿再生编辑植株的获取等步骤。

专利内容

(19)国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 117051030 A (43)申请公布日 2023.11.14 (21)申请号 202310050184.1 (22)申请日 2023.02.01 (71)申请人 西北农林科技大学 地址 712100 陕西省咸阳市陕西省杨凌示 范区邰城路3号 申请人 高景慧　彭嘉文 (72)发明人 高景慧　谢长根　谭璐娜　曹玉曼　 彭嘉文　李淳　夏厚胤　崔祎琳　 马志超　苗愉琪　闫明科　陈礼　 (51)Int.Cl. C12N 15/82 (2006.01) C12N 15/29 (2006.01) A01H 5/00 (2018.01) A01H 6/54 (2018.01) 权利要求书1页 说明书6页 附图4页 (54)发明名称 的筛选，带有丛生芽外植体的培养，紫花苜蓿再 一种紫花苜蓿双靶点基因编辑遗传转化体 生编辑植株的获取等步骤。 系构建的方法 (57)摘要 本发明属于紫花苜蓿基因编辑技术领域，具 体涉及一种紫花苜蓿CRISPR/Cas9遗传转化体系 构建的方法。本发明的目的是弥补目前CRISPR/ Cas9技术在紫花苜蓿基因编辑系统建立和体系 优化的空缺，提供一种基于CRISPR/Cas9技术的 紫花苜蓿高效遗传转化体系，克服在遗传转化过 程中编辑植株再生周期长、转化效率低及依赖基 因型等问题。本发明的体系不同于传统

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