一种单链核酸分子高通量测序文库的构建方法及其应用2023

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(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 111979583 A (43)申请公布日 2020.11.24 (21)申请号 202010949803.7 (22)申请日 2020.09.10 (71)申请人 杭州求臻医学检验实验室有限公司 地址 浙江省杭州市萧山区萧山经济技术开 发区桥南区块鸿兴路111号1号楼101 室 (72)发明人 张腾龙　杨春燕　梁占超　商宇红　 师雅宁　段小红　王东亮　 (74)专利代理机构 重庆百润洪知识产权代理有 限公司 50219 代理人 姚琼斯 (51)Int.Cl. C40B 50/06 (2006.01) C12Q 1/6869 (2018.01) 权利要求书2页 说明书5页 附图1页 (54)发明名称 一种单链核酸分子高通量测序文库的构建 方法及其应用 (57)摘要 本发明涉及生物测序领域，特别涉及一种单 链核酸分子高通量测序文库的构建方法及其应 用；包括以下步骤：从样品细胞中获取单链核酸； 采用片段化试剂对长链的单链核酸样本片段化； 在片段化单链核酸的3'末端加上基团A；加入5' 端被基团B修饰且含有UMI分子标签的单链接头 和盐离子缓冲液，在室温条件下，3'修饰基团A的 片段化单链核酸与5'端修饰基团B单链接头发生 加成反应且连接在一起；加入单向延伸引物1、单 向延伸引物2和单链延伸试剂，用于由单链核酸 变成双链核酸；加入测序引物和PCR混合液进行 A 扩增，扩