发明

一种RNA直接测序的建库方法2024

2023-12-17 07:33:29 发布于四川 1
  • 申请专利号:CN202310986099.6
  • 公开(公告)日:2024-10-08
  • 公开(公告)号:CN117210535A
  • 申请人:北京普译生物科技有限公司
摘要:本发明提供了一种RNA直接测序的建库方法,包括以下步骤:S0制备杂合双链:以待测序RNA序列为模板,通过反转录形成RNA/DNA杂合双链;S1制备接头复合物‑转座酶复合体:将非RNA多核苷酸、解旋酶和转座酶共同孵育,得到接头复合物‑转座酶复合体;S2制备测序文库:利用接头复合物‑转座酶复合体对RNA/DNA杂合双链进行随机剪切得到片段化杂合双链;之后转座酶脱落,得到接头复合物,接头复合物和片段化杂合双链连接,得到测序文库;S3:对步骤S2中的测序文库进行纳米孔测序。本发明实现对目标RNA多核苷酸的碱基序列进行测量的新方法,提高了RNA建库的连接效率,简化了RNA测序建库的流程。

专利内容

(19)国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 117210535 A (43)申请公布日 2023.12.12 (21)申请号 202310986099.6 (22)申请日 2023.08.07 (71)申请人 北京普译生物科技有限公司 地址 100176 北京市大兴区经济技术开发 区荣华中路10号1幢15层1501-3D (72)发明人 马敬芝 张童童 太欣  (74)专利代理机构 北京知元同创知识产权代理 事务所(普通合伙) 11535 专利代理师 吕少楠 (51)Int.Cl. C12Q 1/6806 (2018.01) C12Q 1/6869 (2018.01) C40B 50/06 (2006.01) 权利要求书2页 说明书6页 序列表(电子公布) 附图3页 (54)发明名称 一种RNA直接测序的建库方法 (57)摘要 本发明提供了一种RNA直接测序的建库方 法,包括以下步骤:S0制备杂合双链:以待测序 RNA序列为模板,通过反转录形成RNA/DNA杂合双 链;S1制备接头复合物‑转座酶复合体:将非RNA 多核苷酸、解旋酶和转座酶共同孵育,得到接头 复合物‑转座酶复合体;S2制备测序文库:利用接 头复合物‑转座酶复合体对RNA/DNA杂合双链进 行随机剪切得到片段化杂合双链;之后转座酶脱 落,得到接头复合物,接头复合物和片段化杂合

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